Meyve ve Sebze Mamüllerinde Hidroksimetil Furfural Tayini

aé QuitâS · 07 Ağustos 2010, 14:11

Yöntemin Prensibi

Bu yöntem, hidroksimetil Furfuralun paratoluidin ve barbutirik asit arasındaki reaksiyon sonucunda ortaya çıkan rengin spektrofotometrede okunması ilkesine dayanır.

Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar

[Linkleri görebilmek için üye olmalısınız. Üye olmak için tıklayınız.]
[Linkleri görebilmek için üye olmalısınız. Üye olmak için tıklayınız.]
[Linkleri görebilmek için üye olmalısınız. Üye olmak için tıklayınız.]
[Linkleri görebilmek için üye olmalısınız. Üye olmak için tıklayınız.]
[Linkleri görebilmek için üye olmalısınız. Üye olmak için tıklayınız.]
Spektrofotometre

Terazi
Su Banyosu

Kullanılan Kimyasallar

Barbütirik asit: 500 mg barbütirik asit 100 mL ‘lik balonjojeye alınarak üzerine 60-70 mL saf su eklenerek su banyosu içerisinde çözündürülür. Oda sıcaklığında soğutulduktan sora hacim çizgisine kadar saf su ile seyreltilir.

Paratoluidin çözeltisi: 10 g paratoluidin 50 mL isopropanol içerisinde, su banyosunda çözdürülür. Çözelti 100 mL’lik balonjojeye aktarılır. Kap az bir miktar isopropanol ile yıkanarak bu çözeltide balonjojeye aktarılır. Balonjojeye 10 mL buzlu asetik asit eklenir. Oda sıcaklığında soğutulur ve hacim çizgisine kadar isopropanal ile seyreltilir. Çözeltinin başlangıçtaki renksiz halinin kahverengiye dönüşmesi kullanımını engellemez. Çözelti il 24 saat içerisinde kullanılmamalıdır. Koyu renkli bir şişede saklanılırsa 6 ay kullanılabilinir.

%1’lik suda asetaldehit çözeltisi

Standart HMF çözeltisinin hazırlanması: 200 mg 5-HMF suda çözülür, tamamı 200 mL lik balonjojoye aktarılır, işaret çizgisine kadar saf su eklenir ve iyice karıştırılır.
Stok çözeltinin 1 mL.si 100 mL.lik bolonjojeye aktarılır ve işaret çizgisine kadar saf su ile seyreltilir ve iyice karıştırılır.

Deneyin Yapılışı

Numune Hazırlanması

Gerekirse tohumlar ve tohum kabukları uzaklaştırılır ve numune iyice karıştırılır. Bazı ürünler süzme işleminden daha fazlasını gerektirmez.
Donmuş veya derin dondurulmuş ürünlerin kapalı bir kapta buzu çözülür ve bu işlemle oluşan sıvı, karıştır işleminden önce ürüne ilâve edilir.

a) Renksiz veya açık renkli homojen ürünler
20 mL veya g örnek 100 mL lik balonjojeye aktarılır. 20°C ± 1°C.da kontrol edilen su banyosu üzerine yerleştirilir. Saf su ile hacim çizgisine kadar seyreltilir.
Gerekirse süzüntünün ilk 20 mL. si atılarak çözelti süzülür.

b) Homojen hale getirilmiş ürünler ve koyu renkli ürünler
20 mL veya g örnek, 100 mL.lik balonjojeye aktarılır ve 50 mL su ilave edilir. Üzerine 2 mL Carrez (l) çözeltisi ve 2 mL Carrez (ll) çözeltisi ilave edilir. Saf su ile hacim çizgisine kadar seyreltilir ve karıştırılır. Süzülür ve süzüntünün ilk 20 mL.si atılır.

10 mg/L den daha az serbest kükürt dioksit içeren ürünler
2 mL analizi yapılacak numuneden (a ve b ye göre hazırlanmış) 2 ayrı tüpe 2 ‘şer mL koyulur. Üzerine 5’er mL paratoluidin eklendikten sonra tüplerden birine 1 mL saf su diğerine ise 1 mL barbütirik asit eklenir. Çözeltilerin eklenmesi iki dakika içerisinde gerçekleştirilmelidir. Su eklenen çözelti şahit çözelti olarak kullanılır.

10 mg/L den daha fazla serbest kükürt dioksit içeren ürünler
15 mL meyve suyu (a ve b ye göre hazırlanmış) 25 mL’lik balonjojeye koyulur. Üzerine 2 mL %1’lik asetaldehit çözeltisi ilave edilir. Daha sonra hacim çizgisine kadar saf su ile tamamlanır. Örnek süzülür.

Süzüntüden 2 ayrı tüpe 2 ‘şer mL koyulur. Üzerine 5’er mL paratoluidin eklendikten sonra tüplerden birine 1 mL saf su diğerine ise 1 mL barbütirik asit eklenir. Çözeltilerin eklenmesi iki dakika içerisinde gerçekleştirilmelidir. Su eklenen çözelti şahit çözelti olarak kullanılır.

Örnekler hazırlandıktan sonra 3 dakika içerisinde okunmalıdır.

Spektrofotometre cihazı 550nm’ye ayarlanarak şahit çözelti ile cihazın 0 ayarı yapılır.

Standart eğrinin çizdirilmesi
Standard 5-HMF çalışma çözeltisinin sırasıyla 0,2 - 0,6 . 1,0 . 1,4 . 1,8 ve 2,0 mL.lik
serisi altı ayrı tüpe aktarılır. Her bir tüp için (sonuncu tüp hariç) toplam hacim 2 mL
oluncaya kadar su ilâve edilir.
Bu çözeltiler sırasıyla 2. 6. 10. 14. 18 ve 20 µg 5-HMF içerir. Hazırlanan standart çözteltilerine deney numunesine uygulanan işlemin aynısı uygulanarak absorbans değerlerine karşılık gelen 5-HMF içeriği mikrogram cinsinden bir grafiğe geçirilir.

Hesaplamalar
5-HMF içeriği litrede miligram veya kilogram olarak aşağıdaki şekilde hesaplanır

Veya

mo= Deney numunesinin gram cinsinden ağırlığı
m1= Kalibrasyon grafinden okunan örneğin absornasa karşılık gelen 5-HMF ‘nin mikrogram cinsinden ağırlığı
Vo= Deney numunesinin mL olarak hacmi (deney numunesinin hacim esasına göre alındığında)
V1= Deney çözeltisinin mL olarak hacmi
V2= Tayin için alınan deney numunesinin mL olarak hacmi (örneğin 2 mL)

Benzer Konular :
Konu	Konuyu Başlatan	Forum	Cevaplar	Son Mesaj
Hidroksimetil Furfural (HMF) Tayini	aé QuitâS	Gıda Teknolojisi	0	07 Ağustos 2010 14:10
Meyve ve Sebze	aé QuitâS	Pratik Bilgiler	0	22 Haziran 2010 18:51

Seçenekler
Yazdırılabilir şekli göster Sayfayı E-Mail olarak gönder
Stil
Normal Hybrid-Şeklinde gösterime geç Ağaç şeklinde gösterime geç

Konuyu Toplam 1 Üye okuyor. (0 Kayıtlı üye ve 1 Misafir)

Tavsiye Ettiklerimiz
AlemKO Pvp Server